总反应数的意思是,一共有十个PCR反应要跑,也就是十个小管子。
单独加样的意思是,这十个PCR反应中需要加的引物不同,需要每个管子单独加不同的引物。那么总的来说,就是你有十个PCR反应,每个里面需要加入一样的buffer,dNTP,taq酶,模板DNA和ddH2O,那么你可以把这些成分每个的量都x10,然后混合到 一起,再分到10个PCR管里,这样会省很多时间和枪头。然后再在每个PCR管里分别加入不同的上下游引物,这样10个PCR体系就配好了。上下游引物的问题,每个PCR反应中,都要有两个引物一上一下,才能扩出目的片段,也就是一对引物对应一个片段。