4％多聚甲醛（PFA）配制称取40gPFA溶于装有500mlDEPC水的玻璃容器（烧杯或烧瓶）中，持续加热磁力搅拌至60－65℃,使成乳白色悬液。

用1.0mmol/L的NaOH调PH至7.0使呈清亮状（滴加），再加入约500ml2×PBS，充分混匀（在冰浴或冷水浴中）。可再检测一下PH，过滤后定容至1000ml，室温或4℃（保存备用）。注意：

1. 配制时应在通风条件下操作，并避免接触皮肤及吸入（戴口罩及手套），因PFA有较强的毒性，对粘膜及皮肤有刺激作用。

2. 加热时，温度不可过高，常为60－65℃。否则PFA降解失效，配制好的PFA虽可有效一点时间，但过久的液体，固定效果下降，应用前新鲜配制。除了用DEPC水配制PFA外，也可以用灭菌蒸馏水或经DEPC处理的0.01－0.1％/L的PBS配制，方法及主要事项同上。